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对运动员进行鉴定时，鉴定官首先要进行临床外观判断；然后两性健康知识初级竞赛，再用漱口水做DNA基因检测，把口腔里脱落的细胞收集起来，提取其中的DNA两性霉素静脉注射，用它来做分析。与基因检测同时进行的爱爱口述，还有利用血液样本检测性激素和染色体异常。检测后第7天，性别鉴定实验室将发布可疑对象性别的报告。
何方方说两性霉素静脉注射，正常情况下两性霉素静脉注射，男性的染色体是46XY，女性的染色体是46XX。只要有Y染色体两性健康知识初级竞赛，就可以确定他是一个男性。“此前的多届奥运会都是单从染色体来判断，只要检测出女性运动员具有Y染色体，就不允许参加女子组的比赛。”
性别鉴定官田秦杰说，除艺术体操、花样游泳等适于女性特点的比赛外，绝大多数项目中，男运动员较女运动员高出一筹。在田赛各种项目记录中，男女运动员成绩的差异在10%-18%，而在径赛的项目中两性健康知识初级竞赛，这种差异达到20%。“实际上，雄性激素才是决定运动员体力大小的关键。”男性体内的雄性激素比女性多5倍，正因为男女雄性激素的比例有如此大的差异，才会造成竞技的不公平。
譬如，患有先天性肾上腺增生、真两性畸形等疾病的运动员，即使性染色体表现为女性(XX)，但因为她们体内的雄性激素水平高于正常水平，在力量、速度、耐力、爆发力等方面都占有优势。为了维护比赛的公平性爱爱口述，其参赛资格将被质疑。
何方方解释说：“这意味着，即使通过染色体检验确定运动员为女性身份，但只要身体里的雄性激素超标，参赛的资格也可能受到质疑。”
1932年，波兰女运动员斯坦妮斯洛娃瓦拉谢维奇创造田径女子百米世界纪录，并夺取了奥运金牌两性健康知识初级竞赛。当时就有人对她的性别产生怀疑，但由于性别检查并没有列入奥运会内容两性霉素静脉注射，此事不了了之爱爱口述。
1980年，移居美国的瓦拉谢维奇在一次意外事故中被人枪杀，解剖尸体时法医发现这位“女飞人”原来是一位地地道道的男子。
1964年两性相处的文案，波兰运动员埃瓦克洛布克瓦斯嘉先在女子百米短跑中夺得铜牌，之后又和队友打破4×100米接力世界纪录，摘得这个项目的金牌。但在1968年被查出性染色体不合格，成为首位没有通过性别检测的运动员。
由于性别争议在1964年东京奥运会成为焦点，甚至已经影响到奥运会本身的公平性，国际奥委会决定从1968年第19届奥运会开始，采用检测基因和性染色体两性相处的文案，来鉴定运动员的性别，后来历届奥运会沿用了这一做法。
1985年两性相处的文案，西班牙跨栏女选手帕提诺在日本参加世界大会时，被查出带有Y染色体。之后，这位女运动员多次要求用更科学的方法对其性别进行检测。经过3年的辛苦争取，帕提诺重新取得“女性”身份。
国际体坛关于性别的争议已经延续了近80年，奥运会的性别鉴定也走过了曲折反复的弯路两性霉素静脉注射。1999年，这个备受争议的检测制度于悉尼奥运会前终被废除。而当时废除的一个理由是：并不是所有的生理女性都有标准的女性染色体。
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